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一、PCR擴增檢測實驗室布局設計問題

從行業(yè)標準來講，PCR擴增檢測實驗室需要設計布局四大區(qū)域，且這四大區(qū)域不能挨著，要相對獨立，處于分隔狀態(tài)，包括空氣都不能相通。但根據使用儀器的不同功能，有些區(qū)域可以適當合并。

一區(qū)域：試劑存儲和準備區(qū)域

該區(qū)域主要用于貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。

二區(qū)域：標本制備區(qū)

該區(qū)域主要用于核酸提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于接觸臨床樣本實操，要滿足生物安全二級實驗室操作規(guī)范、防護設備、個人防護要求。

三區(qū)域：擴增區(qū)

該區(qū)域主要用于核酸合成、擴增、檢測。

四區(qū)域：擴增產物分析區(qū)

該區(qū)域主要用于擴增片段的進一步分析測定。

二、PCR擴增檢測實驗室氣流問題

PCR擴增檢測實驗室空氣流向要按照試劑存儲和準備區(qū)流向標本制備區(qū)，再流向擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū)，為了防止擴增產物從空氣氣流流入擴增前的區(qū)域，也可以按照試劑存儲和準備區(qū)流向標準制備區(qū)，再流向擴增區(qū)和擴增產物分析區(qū)這個方向，空氣氣壓遞減的方式進行。

三、PCR擴增檢測實驗室人流物流問題

1）、試劑存儲和準備區(qū)。貯存試劑和用于標本制備的消耗品等材料應當直接運送至試劑貯存和準備區(qū)，不能經過擴增檢測區(qū)，試劑盒中的陽性對照品及質控品不應當保存在該區(qū)，應當保存在標本處理區(qū)。

2)、標本制備區(qū)。針對有可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，可通過在本區(qū)內設立正壓條件，避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染，加入待測核酸后，必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在傳染危險性的材料，必須在生物安全柜內開蓋，并有明確的樣本處理和滅活程序。

3）、擴增區(qū)。為避免氣溶膠所致的污染，應當盡量減少在本區(qū)內的走動。必須注意的是，所有經過檢測的反應管不得在此區(qū)域打開。

4）、擴增產物分析區(qū)。核酸擴增后產物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法、直接或酶切后瓊 脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、核酸測序方法、質譜分析等。